《植物生理学报》
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.2 低温胁迫处理
1.3 RNA 提取及RNA-seq 分析
1.4 实时荧光定量PCR检测
2 结果与分析
2.1 “P1211”和cisc(ta)转录组差异表达分析
2.2 差异表达基因的 qRT-PCR 荧光定量表达验证
2.3 差异表达基因GO分类和显著性富集分析
3 结论与讨论
文章摘要:[目的]鉴定水稻耐冷相关功能基因、解析其调控耐冷性的分子机制。[方法]以耐冷籼稻材料"P1211"和冷敏型籼稻突变体cisc(ta)为试验材料,进行了低温胁迫处理和水稻幼苗转录组测序分析。[结果]冷敏型突变体cisc(ta)低温胁迫处理后共有4 542个差异表达基因,其中有3 673个基因上调,869个基因下调。在冷敏突变体cisc(ta)的差异表达基因中筛选到一些与低温胁迫相关的典型基因,如基本的螺旋-环-螺旋(bHLH)、活性氧清除(SOD1)和富亮氨酸重复序列(LRR)等调控基因,此外,还筛选出一些与生长素、脱落酸(ABA)、赤霉酸(GA)和冷应激反应调控(DREB/CBF)等相关的基因。为了确认RNA-seq数据,随机选择差异表达基因进行实时荧光定量PCR(qRT-PCR)表达分析,结果与这些基因的RNA-seq表达测定一致,证实了RNA-seq数据的准确性。[结论]该研究为水稻耐冷机理的研究和筛选水稻遗传改良有用的候选基因奠定基础。
文章关键词:
论文分类号:S511